ABSTRACT
Introducao: O padrao-ouro para o diagnostico de COVID-19 e o teste molecular que permite a deteccao de acidos nucleicos de SARS-CoV-2 em amostras de swab Nasofaringeo (NPS). A deteccao precoce seguida do isolamento dos individuos infectados desempenha um papel crucial para impedir a propagacao da infeccao e o controle da pandemia. No entanto, a coleta de NPS e invasiva e desconfortavel para os pacientes, requer profissionais de saude especializados e pode ser um risco de infeccao cruzada para esses profissionais. Desta forma, avaliar outras fontes de material biologico, tal como a saliva, e fundamental para facilitar o diagnostico de COVID-19. Objetivo: O objetivo deste trabalho foi avaliar o uso da saliva como amostra biologica para a deteccao do RNA do SARS-CoV-2 e sua estabilidade pos coleta. Material e Metodos: Foram coletadas 954 amostras de saliva (5 mL) e de swab nasofaringeo (NPS) de individuos entre dezembro de 2020 e fevereiro de 2021 e analisadas em diferentes tempos (24h, 48h, 72h, 5 dias e 10 dias) apos a coleta. As amostras de saliva foram armazenadas em temperatura de 2degree a 8degreeC e extraidas puras e diluidas em solucao salina na proporcao 1:1. A extracao do RNA foi realizada em extrator automatico de acidos nucleicos (Extracta, Loccus) e o diagnostico molecular do SARS-CoV-2 foi realizado com o kit Gene FinderTM COVID-19 Plus RealAmp (OSang Healthcare). A idade media dos participantes foi de 37 anos (8 a 83 anos de idade) e a maioria dos individuos 738 (77,3%) foram nao-detectaveis e apenas 216 (22,7%) foram detectaveis para SARS-CoV-2. Entre os detectaveis, 96 (44,4%%) eram do sexo masculino e 120 (55,6%) do sexo feminino. A positividade na saliva foi posteriormente comparada com os resultados do NPS bem como a carga viral ou ciclo de limiar de amplificacao (Ct). Resultados e Discussao: A analise dos testes com a saliva e NPS demonstrou concordancia nos resultados de 210 (97%) pacientes detectaveis para COVID, em apenas 2,7 % (6/216) dos casos o SARS-CoV-2 foi detectado somente no NPS. Todos os participantes com resultado positivo para a RT-PCR apresentaram sintomas relacionados a COVID-19, sendo os mais comuns: tosse seca (19%), dor de cabeca (16%), coriza e dor de garganta (11%) e diarreia (8%). As amostras de salivas apresentaram estabilidade ate o decimo dia apos a coleta do material biologico, sem diferenca de deteccao do RNA viral entre a amostra de saliva pura e saliva diluida. Esses resultados demonstram que as amostras de saliva podem ser transportadas e armazenadas em temperatura de 2degree a 8degreeC, e processadas em ate 10 dias apos a coleta. Conclusao: Os resultados mostraram que a saliva e uma alternativa para a deteccao de SARS-CoV-2. E uma amostra biologica confiavel, nao invasiva, de facil coleta e com resultados similares aos obtidos com amostras de NPS. E uma alternativa que facilitaria a coleta em lugares com baixo suprimento de swabs nasofaringeos e regioes distantes de laboratorios especializados, uma vez que pode ser analisada ate 10 dias apos a coleta. Dessa forma, podemos concluir que a saliva pode ser utilizada com seguranca para o diagnostico de COVID-19. Copyright © 2022
ABSTRACT
Introdução: O Bortezomibe (Velcade®) é um inibidor do proteassoma, especificamente do proteassoma 26S, cuja ligação irreversível leva à ativação de cascatas de sinalização que culminam com a parada do ciclo celular e apoptose. Ele foi aprovado e incluído como quimioterapia de primeira linha nas Diretrizes Diagnósticas e Terapêuticas do Mieloma Múltiplo (Portaria n.° 2017) publicadas em agosto de 2015 mas apenas em setembro de 2020 foram publicadas três Portarias do Ministério da Saúde que incorporaram este medicamento para o tratamento de pacientes com Mieloma Múltiplo no SUS (para pacientes não tratados, inelegíveis ao transplante de células-tronco;para pacientes não tratados, elegíveis ao transplante e para pacientes previamente tratados). Esta incorporação permitiu o uso mais amplo desta medicação e trouxe à tona complicações possivelmente relacionadas ao seu uso como a reativação de citomegalovírus e suas diversas formas de apresentação clínica como pneumonites, infecções gastrointestinais, hepatites, encefalites, retinites, entre outras. Série de casos: No ano de 2020, foram identificados 5 casos de infecção por citomegalovírus em pacientes em tratamento de Mieloma Múltiplo e Amiloidose em uso de esquemas quimioterápicos contendo Bortezomibe no serviço de Hematologia e Hemoterapia do Hospital das Clínicas de Ribeirão Preto/SP. Três casos foram identificados na investigação etiológica de diarréia subaguda, um foi identificado na estratificação de colite neutropênica com características enteroinvasivas e o último na investigação de pneumonite aguda com sinais de infecção viral em tomografia de tórax (neste caso, foi excluída infecção por Covid-19 após dois testes PCR-RT negativos). Em todos os casos, após identificação da infecção por CMV (por sorologia - Elisa e confirmação de carga viral por PCR-RT), foi instituída terapêutica específica com antiviral, tanto Ganciclovir endovenoso quanto Valganciclovir via oral. Apesar da alta morbimortalidade associada a esta infecção em pacientes imunossuprimidos, apenas um dos cinco pacientes faleceu de complicações associadas. Discussão: A soroprevalência elevada de infecção por citomegalovírus no Brasil está relacionada a fatores socioeconômicos e condições precárias de saneamento básico e aumenta a morbimortalidade em pacientes imunossuprimidos. O uso mais frequente do Bortezomibe como primeira linha em pacientes com Mieloma Múltiplo e Amiloidose no nosso serviço e no Brasil traz à tona este agente como diagnóstico diferencial nas suspeitas clínicas infecciosas de diversos órgãos e sistemas.